معرف ایندول کواکس مرک
معرف ایندول کواکس در سال 1928 توسط شیمی دان مجارستانی اروین کواکس ( Erwin Kovacs ) اختراع شد. این معرف ، یک معرف بیوشیمیایی متشکل از ایزوآمیل الکل، پارا دی متیل آمینو بنزآلدئید (DMAB) و اسید کلریدریک غلیظ برای شناسایی میکروارگانیسم های ایندول مثبت و ایندول منفی می باشد. این ماده برای آزمایش تشخیصی ایندول ، برای تعیین توانایی ارگانیسم در جدا کردن ایندول از اسید آمینه تریپتوفان استفاده می شود.
آزمایش ایندول چیست
آزمایش ایندول یک آزمایش بیوشیمیایی است که بر روی گونه های باکتریایی انجام می شود تا توانایی ارگانیسم برای تبدیل تریپتوفان به ایندول را مشخص کند. این تقسیم توسط زنجیره ای از تعدادی آنزیم مختلف درون سلولی انجام می شود، سیستمی که عموماً به آن «تریپتوفاناز» می گویند.
ایندول از طریق دآمیناسیون احیا کننده از تریپتوفان از طریق مولکول واسطه ایندولپیروویک اسید تولید می شود. تریپتوفاناز واکنش دآمیناسیون را کاتالیز می کند که طی آن گروه آمین (-NH2) مولکول تریپتوفان حذف می شود. محصولات نهایی واکنش ایندول، پیروویک اسید، آمونیوم (NH4+) و انرژی است. پیریدوکسال فسفات به عنوان کوآنزیم مورد نیاز است.
روش آزمایش
مانند بسیاری از آزمایشهای بیوشیمیایی روی باکتریها، نتایج آزمایش ایندول با تغییر رنگ بدنبال واکنش با یک معرف اضافه شده نشان داده میشود. قبل از انجام آزمایش، کشت خالص باکتری باید به مدت 24 تا 48 ساعت در براث تریپتوفان یا پپتون استریل رشد کند. پس از انکوباسیون، پنج قطره از معرف کواکس به محیط کشت براث اضافه می شود.
نتیجه مثبت این آزمایش به صورت رنگ قرمز یا قرمز مایل به بنفش در لایه الکل سطحی براث مشخص می شود. همچنین نتیجه منفی به رنگ زرد نمایان می شود. به علاوه یک نتیجه متغیر نیز می تواند رخ دهد که به رنگ نارنجی نمایان می شود. این به دلیل وجود اسکاتول است که به عنوان متیل ایندول یا ایندول متیله شده نیز شناخته می شود ، که یکی از محصولات احتمالی تجزیه تریپتوفان است.
کاتالوگ نامبر | پک | نام لاتین | شرایط نگهداری |
1092930100 | 100 ml | KOVACS’ indole reagent | +2°C تا +8°C. |